Detección fenotípica y molecular de la B-lactámico resistencia en cepas de Staphylococcus aureus
Torres, Luis ¹; Calvo, Alberto ²; Colmenares, José ¹; Rodríguez, Nicolas ²; Pedroza, Raquel ³.
¹ Escuela de Bioanálisis. Microbiología. UCV;
² Sección de Bacteriología. Policlínica Metropolitana;
³ Sección Biología Molecular Agentes Infecciosos. Instituto de Medicina Experimental. UCV, Venezuela.

La resistencia a meticilina y demás B-lactámicos en Staphylococcus aureus esta asociada principalmente a la presencia de una PBP homologa a la normal (PBP 2a) codificada por el gen mecA, pero con pobre afinidad por los B-lactámicos. La expresión de este mecanismo puede ser de alto nivel de resistencia (homogénea) o con niveles de resistencia variables (heterogénea), en esta última puede dificultarse la detección. Tradicionalmente la detección fenotípica se realizaba evaluando la susceptibilidad a oxacilina. A partir del 2004 la NCCLS recomienda el uso del cefoxitin, como herramienta para detectar la meticilino resistencia. En esta investigación se detecto de manera fenotípica y molecular la meticilino ó B-lactámico resistencia en 49 cepas de Staphylococcus aureus aisladas en el laboratorio de la Policlínica Metropolitana. Fenotípicamente se utilizaron métodos sugeridos por la NCCLS: susceptibilidad por difusión y CIM a oxacilina y cefoxitin, crecimiento en agar Mueller-Hinton con 6 ug/ml de oxacilina. Se realizó la detección de PBP2a por aglutinación y del gen mecA mediante PCR. El 88% de los aislados mostró resistencia a oxacilina por difusión (homogénea 57% y heterogénea 31%), la CIM y el crecimiento en 6 ug/ml de oxacilina arrojaron 88% de resultados positivos. El disco de cefoxitin detecto 86% de resistencia homogénea. Los métodos de referencia (detección de PBP2a y gen mecA) detectaron 84% de resistencia a B-lactámicos. Se encontró una cepa resistente a oxacilina y cefoxitin pero no portadora de PBP2a ni gen mecA, pudiera tratarse de hiperproducción de B-lactamasas o modificación de PBPs normales. Se observó resistencia asociada a gentamicina (63%) y ciprofloxacina (50%). Se observó 10% de inducción de metilasas por el gen erm y 100% de sensibilidad a vancomicina, linezolid y quinuspristin/dalfopristin.